Детекция редуктивного стресса в клетках церебрального эндотелия методом FLIM-микроскопии: новые подходы к оценке эндотелиальной дисфункции
Бюджетное финансирование в рамках государственного задания , №1023101100004-9-3.1.8;3.1.4
Колотьева Н.А.
1, Новикова С.В.
1, Розанова Н.А.
1, Макаров В.И.
2, Рябова А.В.
2, Бердников А.К.
1, Лукьянчук А.Н.
1, Мударисова Р.С.
1, Николаева Л.В.
3, Комлева Ю.К.
1, Салмина А.Б.
11ФГБНУ Российский центр неврологии и нейронаук, Москва, Россия
2Институт общей физики им. А.М. Прохорова РАН, Москва, Россия
3 ФГБОУ ВО ” Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого“ Минздрава России, Красноярск, Россия
Email: kolotyeva.n.a@neurology.ru, vi.makarov@physics.msu.ru, nastya.ryabova@nsc.gpi.ru, yuliakomleva@mail.ru, allasalmina@mail.ru
Поступила в редакцию: 13 ноября 2025 г.
В окончательной редакции: 2 декабря 2025 г.
Принята к печати: 24 марта 2025 г.
Выставление онлайн: 8 июня 2026 г.
Нейродегенеративные процессы усиливаются изменением окислительно-восстановительного потенциала клетки. Редуктивный стресс, преобладание восстановленных форм коферментов NADH, NADPH, GSH нарушает функции клеточных органелл, таких как митохондрии. Целью исследования является определение путей воздействия редуктивного стресса на клетки церебрального эндотелия. В исследовании впервые изучено влияние редуктивного стресса на функции митохондрий и метаболический профиль клеток церебрального эндотелия in vitro с использованием флуоресцентной микроскопии с измерением времени жизни флуоресценции (FLIM-микроскопия). 24 h инкубация с 500 μM дитиотреитола (DTT) не изменила митохондриальный потенциал и содержание суммарного пула NAD+ и NADH, но увеличила концентрацию супероксид-аниона, указывая на возникновение окислительного стресса. Исследования с фазор-FLIM выявили увеличение короткоживущей NADH-компоненты уже через 1 h инкубации, что свидетельствует о метаболических перестройках. Результаты предполагают адаптацию клеточного метаболизма в пользу усиленного гликолиза, что при длительном воздействии может нарушить проницаемость гематоэнцефалического барьера и ускорить нейродегенеративные процессы. Полученные данные раскрывают ранние механизмы метаболической перестройки клеток церебрального эндотелия при редуктивном стрессе и демонстрируют потенциал FLIM-микроскопии в поиске терапевтических мишеней, направленных на сохранение целостности гематоэнцефалического барьера. Ключевые слова: редуктивный стресс, церебральный эндотелий, FLIM-микроскопия, функция митохондрий, NADH.
- O.L. Lopatina, Y.K. Komleva, N.A. Malinovskaya, Y.A. Panina, A.V. Morgun, A.B. Salmina. Front. Immunol., 11 (2020). DOI: 10.3389/fimmu.2020.585294
- A.B. Salmina, E.V. Kharitonova, Y.V. Gorina, E.A. Teplyashina, N.A. Malinovskaya, E.D. Khilazheva, A.I. Mosyagina, A.V. Morgun, A.N. Shuvaev, V.V. Salmin, O.L. Lopatina, Y.K. Komleva. Int. J. Mol. Sci., 22 (9), 4661 (2021). DOI: 10.3390/ijms22094661
- A.B. Salmina. Neurochem. J., 17 (3), 325-337 (2023). DOI: 10.1134/S1819712423030157
- E.A. Pozhilenkova, O.L. Lopatina, Y.K. Komleva, V.V. Salmin, A.B. Salmina. Rev. Neurosci., 28 (4), 397-415 (2017). DOI: 10.1515/revneuro-2016-0071
- U.H. Langen, S. Ayloo, C. Gu. Annu. Rev. Cell Dev. Biol., 35 (1), 591-613 (2019). DOI: 10.1146/annurev-cellbio-100617-062608
- D.N. Doll, H. Hu, J. Sun, S.E. Lewis, J.W. Simpkins, X. Ren. Stroke, 46 (6), 1681-1689 (2015). DOI: 10.1161/STROKEAHA.115.009099
- Y. Wang, J. Wu, J. Wang, L. He, H. Lai, T. Zhang, X. Wang, W. Li. Mitochondrion, 69, 71-82 (2023). DOI: 10.1016/j.mito.2023.01.007
- W.-X. Ma, C.-Y. Li, R. Tao, X.-P. Wang, L.-J. Yan. OMCL, 1-11 (2020). DOI: 10.1155/2020/5136957
- J.J. Heindel, B. Blumberg, M. Cave, R. Machtinger, A. Mantovani, M.A. Mendez, A. Nadal, P. Palanza, G. Panzica, R. Sargis, L.N. Vandenberg, F. vom Saal. Reprod. Toxicol., 68, 3-33 (2017). DOI: 10.1016/j.reprotox.2016.10.001
- E.J. Anderson, M.E. Lustig, K.E. Boyle, T.L. Woodlief, D.A. Kane, C.-T. Lin, J.W. Price, L. Kang, P.S. Rabinovitch, H.H. Szeto, J.A. Houmard, R.N. Cortright, D.H. Wasserman, P.D. Neufer. J. Clin. Invest., 119 (3), 573-581 (2009). DOI: 10.1172/JCI37048
- Y.-H. Wu, H.-L. Hsieh. Antioxidants, 12 (10), 1816 (2023). DOI: 10.3390/antiox12101816
- A. Krakowiak, S. Pietrasik. Biology, 12 (6), 875 (2023). DOI: 10.3390/biology12060875
- T.S. Blacker, Z.F. Mann, J.E. Gale, M. Ziegler, A.J. Bain, G. Szabadkai, M.R. Duchen. Nat. Commun., 5 (1), 3936 (2014). DOI: 10.1038/ncomms4936
- A. Song, N. Zhao, D.C. Hilpert, C. Perry, J.A. Baur, D.C. Wallace, P.M. Schaefer. Commun. Biol., 7 (1), 428 (2024). DOI: 10.1038/s42003-024-06123-7
- Y. Liu, Q. Xue, Q. Tang, M. Hou, H. Qi, G. Chen, W. Chen, J. Zhang, Y. Chen, X. Xu. Microvasc. Res., 90, 199-205 (2013). DOI: 10.1016/j.mvr.2013.08.004
- М.Р. Капкаева, А.Б. Салмина, Е.Д. Хилажева, Д.Н. Воронков. Способ выделения эндотелия микрососудов мозга крысы [Электронный ресурс]. URL: https://www.fips.ru/registers-doc-view/fips_servlet
- L. Yan, W. Liu, H. Zhang, C. Liu, Y. Shang, Y. Ye, X. Zhang, W. Li. J. Cell Sci., (2014). DOI: 10.1242/jcs.135293
- R.C. Scaduto, L.W. Grotyohann. Biophys. J., 76 (1), 469-477 (1999). DOI: 10.1016/S0006-3495(99)77214-0
- M. Mladenov, L. Lubomirov, O. Grisk, D. Avtanski, V. Mitrokhin, I. Sazdova, M. Keremidarska-Markova, Y. Danailova, G. Nikolaev, R. Konakchieva, H. Gagov. Antioxidants, 12 (5), 1126 (2023). DOI: 10.3390/antiox12051126
- S. Ranjit, L. Malacrida, D.M. Jameson, E. Gratton. Nat. Protoc., 13 (9), 1979-2004 (2018). DOI: 10.1038/s41596-018-0026-5
- C. Stringari, A. Cinquin, O. Cinquin, M.A. Digman, P.J. Donovan, E. Gratton. PNAS, 108 (33), 13582-13587 (2011). DOI: 10.1073/pnas.1108161108
- L.S.S. Ferreira, C.S. Fernandes, M.N.N. Vieira, F.G. De Felice. Front. Neurosci., 12 (2018). DOI: 10.3389/fnins.2018.00830
- A.Sedzikowska, L. Szablewski. Int. J. Mol. Sci., 22 (18), 9987 (2021). DOI: 10.3390/ijms22189987
- O.L. Lopatina, Y.A. Panina, N.A. Malinovskaya, A.B. Salmina. Rev. Neurosci., 32 (2), 131-142 (2021). DOI: 10.1515/revneuro-2020-0077
- A.S. Averchuk, M.V. Ryazanova, T.I. Baranich, A.V. Stavrovskaya, N.A. Rozanova, S.V. Novikova, A.B. Salmina. Bull. Exp. Biol. Med., 175 (3), 315-320 (2023). DOI: 10.1007/s10517-023-05859-2
Подсчитывается количество просмотров абстрактов ("html" на диаграммах) и полных версий статей ("pdf"). Просмотры с одинаковых IP-адресов засчитываются, если происходят с интервалом не менее 2-х часов.
Дата начала обработки статистических данных - 27 января 2016 г.